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技術(shù)文章

為什么要使用程序降溫儀

更新時(shí)間:2019-05-24 瀏覽次數:2634


程序降溫儀是實(shí)現生物樣本低溫凍存的關(guān)鍵設備。在常溫樣本需要向液氮低溫環(huán)境轉移時(shí),可以介導生物樣本的降溫過(guò)程。廣泛應用在干細胞移植、臍血凍存、眼角膜、心臟瓣膜、皮膚等器官組織的低溫保存等領(lǐng)域,并正在向低溫材料學(xué)科和農牧領(lǐng)域擴展。
 

樣品凍存過(guò)程中,降溫速率過(guò)快/過(guò)慢都會(huì )對細胞造成損傷以致影響復蘇活性。降溫過(guò)快時(shí),細胞內的水迅速結晶,冰晶會(huì )對細胞造成內部損傷;如果降溫速度過(guò)慢,細胞外的水先結冰,會(huì )在細胞內外產(chǎn)生滲透壓,會(huì )造成細胞脫水,降低細胞復蘇率。


以上問(wèn)題,可通過(guò)程序降溫儀對降溫速率的“精細控制”輕松解決——降溫的不同階段,采用不同的降溫速率,可有效減少細胞損傷,提高復蘇率。一般為“先慢凍,后快凍”。
 

目前市面上常用的程序降溫儀工作原理是,通過(guò)微處理器控制系統和電磁閥,控制噴入腔體中的液氮量來(lái)控制降溫速率。其優(yōu)點(diǎn)是:控溫,受外界環(huán)境影響小。尤其是處理大體積樣本時(shí),快速?lài)娙氲拇罅恳旱讕ё邩颖局械臐摕?,從而快速降溫,保證更好的樣本復蘇活性。
 

 

TF Graph


以上是一張較為典型的程序降溫儀運行曲線(xiàn)圖。由圖可以看出,樣品在相變過(guò)程中(液態(tài)->固態(tài))會(huì )釋放大量潛熱。當潛熱點(diǎn)出現,凍存液開(kāi)始結冰時(shí),樣本開(kāi)始釋放熱量,溫度可能反而會(huì )上升。此時(shí),就需要向腔體內迅速?lài)娙氪罅恳旱?,從而快速降溫,拉大溫差,帶走熱量,使得生物樣本迅速越過(guò)相變期。
 

實(shí)踐證明:使用程控降溫儀經(jīng)熱量補償后,1-3℃ / min的降溫速率可大大提高凍存細胞的復蘇率。
 


除此之外,程序降溫儀一般均配置有熱敏打印機,可以記錄生物樣本批次凍存的溫度曲線(xiàn),并可打印保存。通過(guò)控制過(guò)程,消除批次實(shí)驗中的差異性,保證所有批次生物樣本凍存的質(zhì)量穩定性和可重復性。
 

不過(guò),復蘇率才是檢驗凍存是否成功的重要標準。有時(shí),即使沒(méi)有程序降溫儀設備介導降溫程序,只要能夠保證樣本的穩定復蘇率,也是成功的凍存過(guò)程。
 

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