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這樣操作腫瘤解離試劑盒，即簡(jiǎn)單又快速
更新時(shí)間：2021-08-26 瀏覽次數：639
腫瘤解離試劑盒具有高效、快捷、易批量操作等優(yōu)點(diǎn)，不同的廠(chǎng)家提供不同種類(lèi)，不同類(lèi)型的腫瘤解離試劑盒產(chǎn)品，為科研用戶(hù)帶來(lái)方便。
實(shí)驗前的準備工作：
1、準備好所有實(shí)驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等；
2、確定試劑盒在有效期內；
3、仔細閱讀說(shuō)明書(shū)；
4、按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全；
5、標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個(gè)復孔以上的量制備，盡量分裝做備份；
6、根據檢測標本數量確定所需試劑的量；
7、按說(shuō)明書(shū)將所用試劑盒平衡至室溫，配制所需試劑。
腫瘤解離試劑盒的操作步驟：
1、使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差；
2、根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個(gè)標準品和空白孔建議做復孔。每個(gè)樣品根據自己的數量來(lái)定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內；
3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)；
4、甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次；
5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘；
6、甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次；
7、每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照；
8、取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果；
9、在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。