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如何大規模培養動(dòng)物細胞(下)
更新時(shí)間:2021-09-23 瀏覽次數:2458
連續式培養
連續式培養是一種常見(jiàn)的懸浮培養模式,采用機械攪拌式生物反應器系統。
理論上講,該過(guò)程可無(wú)限延續下去。連續培養的優(yōu)點(diǎn)是反應器的培養狀態(tài)可以達到恒定,細胞在穩定狀態(tài)下生長(cháng)。穩定狀態(tài)可有效地延長(cháng)分批培養中的對數生長(cháng)期。
在穩定狀態(tài)下細胞所處的環(huán)境條件如營(yíng)養物質(zhì)濃度、產(chǎn)物濃度、pH值可保持恒定,細胞濃度以及細胞生長(cháng)速率可維持不變。細胞很少受到培養環(huán)境變化帶來(lái)的生理影響,特別是生物反應器的主要營(yíng)養物質(zhì)葡萄糖和谷氨酰胺維持在一個(gè)較低的水平,從而使它們的利用效率提高,有害產(chǎn)物積累有所減少。
然而,在高的稀釋率下,雖然死細胞和細胞碎片及時(shí)清除,細胞活性高,最終細胞密度得到提高,可是產(chǎn)物卻不斷在稀釋?zhuān)蚨a(chǎn)物濃度并不提高;尤其是細胞和產(chǎn)物不斷地稀釋?zhuān)瑺I(yíng)養物質(zhì)利用率、細胞增長(cháng)速率和產(chǎn)物生產(chǎn)速率低下。
由于是開(kāi)放式操作,加上培養周期較長(cháng),容易造成污染,在長(cháng)周期的連續培養中,細胞的生長(cháng)特性以及分泌產(chǎn)物容易變異;
灌注式培養
灌注式培養,也稱(chēng)灌流式培養,是連續式培養常見(jiàn)的方式。
(1)攪拌式生物反應器
用于懸浮細胞培養,這種反應器必須具有細胞截流裝置,細胞截留系統開(kāi)始多采用微孔膜過(guò)濾或旋轉膜系統,最近開(kāi)發(fā)的有各種形式的沉降系統或透析系統。
(2)固定床或流化床生物反應器
固定床是在反應器中裝配固定的籃筐,中間裝填聚酯纖維載體,細胞可附著(zhù)在載體上生長(cháng),也可固定在載體纖維之間,靠攪拌中產(chǎn)生的負壓,迫使培養基不斷流經(jīng)填料,有利于營(yíng)養成分和氧的傳遞,這種形式的灌流速度較大,細胞在載體中高密度生長(cháng)。
圖 01
片狀載體在生物反應器上使用的一般流程
連續灌注培養是近年用于動(dòng)物細胞培養生產(chǎn)分泌型重組治療性藥物和嵌合抗體及人源化抗體等基因工程抗體較為推崇的一種方式。這種方法最大的缺點(diǎn)是污染幾率較高以及長(cháng)期培養中細胞分泌產(chǎn)品的穩定性、規模放大過(guò)程中工程問(wèn)題。
針對這些使用生物反應器培養細胞中的一些痛點(diǎn),搏旅提供了一系列的解決方案,采用理念與技術(shù),打造出一批批精品的生物反應器,為客戶(hù)提供反應器和技術(shù)服務(wù)。
圖 02
固流床細胞生物反應器
細胞工廠(chǎng)培養
細胞工廠(chǎng)是一種設計精巧的細胞培養裝置。它在有限的空間內利用了培養表面,從而節省了大量的廠(chǎng)房空間,并可節省貴重的培養液。
同時(shí),與NUNC的細胞工廠(chǎng)操作儀結合使用,可全面實(shí)現細胞培養的自動(dòng)化,從而大大地減低勞動(dòng)強度和密集度。這套系統使用很方便,可產(chǎn)生類(lèi)似塑料培養瓶的效果。
圖 03
細胞工廠(chǎng)系統